AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DE MIRNAS ENVOLVIDOS NA SINALIZAÇÃO DOS RECEPTORES DO TIPO TOLL (TLRS) NA HANSENÍASE E EPISÓDIOS REACIONAIS - Tese de Doutorado 2021

Português, Brasil

Introdução: A hanseníase é uma doença infectocontagiosa crônica, dermatoneurológica causada pelo bacilo Mycobacterium leprae e que ainda constitui um desafio de saúde pública em muitos países, incluindo o Brasil. Embora os mecanismos imunopatológicos pelos quais o bacilo continua sendo persistente, ocasionando as formas clínicas complexas da doença e episódios reacionais não sejam totalmente compreendidos,a participação dos receptores do tipo Toll (TLRs) na mediação da resposta inflamatória é amplamente reconhecida. Neste contexto, avaliamos a expressão de miRNAs participantes no controle pós-transcricional das vias dos TLRs em indivíduos com hanseníase. Materiais e Métodos: Selecionamos os miRNAs em softwares de domínio público (TargetScanHuman e miRBase); realizamos a expressão gênica por PCR em tempo real utilizando 11 ensaios-miRs (146a-5p, 146b-5p, 147a, 155-5p, 9-3p, 125a-3p, 132-5p, 21-3p, let-7a-3p, 511-3p, 103a-3p) e o U6snRNA (RNA nucleolar) em 38 amostras sendo 28 biópsias (14 indivíduos sem reação (SR) e 14 indivíduos reacionais) e 10 amostras de células (4 indivíduos (antes e após Reação Reversa (RR)) e 6 indivíduos (antes e após eritema nodoso hansênico (ENH)); a dosagem de proteínas foi feita pela técnica ELISA sanduíche; após a normalização da expressão gênica pelos genes endógenos pelo programa RefFinder, os dados estatísticos referente as biópsias foram gerados pelo teste t de Welch e nas células pelo teste de Wilcoxon; já nas análises de citocinas/quimiocinas e do índice bacilar o teste de Correlação de Spearman, por meio do GraphPad Prism8. Resultados: Em biópsias houve um aumento significante na expressão do miR-125a-3p em indivíduos PB e ENH, nas comparações (PB vs MB e vs RR; ENH vs MB) e uma correlação (+) entre este miR o IB em pacientes reacionais. Para o miR-147a, houve uma correlação (+) com IL-8, CXCL-10 e IB em indivíduos SR; também nos SR houve correlação entre o miR-155-5p e CXCL-9 e correlação (-) entre o miR-21-3p e IL-1β. Observamos também correlações (+) entre os miRs 146b-5p e 132-5p e IB em indivíduos reacionais (RR + ENH). Conclusões: Os miRNAs além de associados a formas clínicas, estão correlacionados a marcadores imunológicos e clínicos. Os miRs 125a-3p e 147a parecem ter um papel mais destacado na patogênese.

Docente Orientador: 
Palavras-chave: 
1. Hanseníase; 2. Episódio reacional; 3. Receptores Toll-Like; 4. Expressão de miRNAs; 5. Sorologia.
Banca examinadora: 
Léa Cristina de Carvalho Castellucci (Presidente/orientador) Ryan dos Santos Costa Natália Machado Tavares Theolis Costa Barbosa Bessa Dalila Lucíola Zanette
Ano de publicação: 
2021