O Papel do Receptor do Tipo Toll 2 e do Receptor do Tipo Toll 4 na Modulação da Resposta Inflamatória em Pacientes com Leishmaniose Cutânea causada por Leishmania braziliensis - Tese de Doutorado 2018

Português, Brasil

Introdução: A Leishmaniose cutânea humana (LC) causada por Leishmania braziliensis caracteriza-se pelo aparecimento de uma lesão, geralmente única, e por uma forte resposta inflamatória que está associada ao desenvolvimento da úlcera leishmaniótica. Os monócitos/macrófagos são as principais células que albergam o parasito e também são responsáveis pela sua destruição. Monócitos/macrófagos de pacientes com LC infectados com L. braziliensis produzem mais moléculas inflamatórias quando comparado com células de controles sadios (CS), mas não tem capacidade de eliminar a leishmania. A via de sinalização dos receptores Toll-like (TLR) é um dos primeiros sistemas de defesa  contra  patógenos  e  leva  à  transcrição  de  mediadores  inflamatórios como a produção de IL-1β e TNF durante a resposta imune inata. Recentemente nós documentamos que monócitos de pacientes com LC expressavam mais TLR2 e TLR4 do que células de CS e essa expressão estava associada a maior produção de TNF, principal citocina associada ao desenvolvimento da lesão na LC. O uso de drogas antagonistas de TLRs já tem sido avaliado em modelos pré-clínicos e clínicos de doenças inflamatórias. A nossa hipótese é que o bloqueio desses receptores pode atenuar a forte resposta inflamatória observada nessa doença. Objetivos: Avaliar o papel de antagonistas de TLR2 e TLR4 na modulação da forte resposta inflamatória observada na LC causada por L.braziliensis. Métodos: Monócitos de pacientes com LC e de CS foram tratados com anticorpos bloqueadores de TLR2 e TLR4 e  infectados  com  L.braziliensis.  A  expressão  da  explosão  respiratória  foi analisada  através  da  citometria  de  fluxo.  A  avaliação  da  infecção  dos monócitos foi determinada por microscopia óptica. Células da lesão também foram tratadas com anticorpos bloqueadores de TLRs. A avaliação da produção de quimiocinas e citocinas foi avaliada através de citometria de fluxo e da tecnica imunoenzimática (ELISA). Resultados: A expressão de TLR2 e TLR4 ex vivo e após infecção em monócitos de pacientes com LC foi maior quando comparado com monócitos de CS. O bloqueio de TLR2 e TLR4 reduziu a resposta oxidativa em células de pacientes com LC, mas não em células de CS. Após o bloqueio desses receptores o número de células infectadas e do número de parasitas internalizados diminuiu nos monócitos de pacientes com LC. O bloqueio simultâneo desses receptores também diminuiu a produção de IL1β e TNF por monócitos de pacientes com LC. Também foi observada uma diminuição da produção de TNF por células das biópsias após bloqueio simultâneo dos receptores. Conclusão: Os resultados desse estudo sugerem que os receptores TLR2 e TLR4 participam do processo de internalização da Leishmania braziliensis e da forte resposta inflamatória responsável pelo desenvolvimento da úlcera leishmaniótica. E abre pespectivas para o uso de drogas anti-inflamatórias, bloqueadoras desses receptores, como terapêutica associada ao tratamento convencional.

 

Docente Orientador: 
Palavras-chave: 
1. Leishmaniose Cutânea; 2. Leishmaniose Braziliensis; 3. Imunoregulação.
Banca examinadora: 
Profa. Dra. Maria Olívia Ramos Bacellar, Doutora em Imunologia/UFBA - UFBA (Presidente/orientador); Profa. Dra. Claudia Ida Brodskyn, Doutora em Imunologia/USP, Professor Titular UFBA; Prof. Dra. Natália Barbosa Carvalho, Doutora em Bioquímica e Imunologia/UFMG, Professor Substituto UFBA; Prof. Dra. Deboraci Brito Prates, Doutora em Patologia Humana/UFBA, Professora Adjunta 3 UFBA; Profa. Dra. Lis Ribeiro do Valle Antonelli, Doutora em Bioquímica e Imunologia/UFMG, Pesquisadora Adjunta do CPqRR/Fiocruz-Minas Gerais
Ano de publicação: 
2018